A ELISA teszt egy orvosi laboratóriumi vizsgálat, amely úgynevezett antigén-antitest reakciót eredményez. Különböző antigének tesztelhetők, amelyek szerepet játszanak az emberi vagy állatgyógyászatban. Németországban csak az akkreditált laboratóriumi intézetek bízják meg a vizsgálat elvégzését.
Mi az eljárás?
Az ELISA a Enzimmel kapcsolt immunszorbens vizsgálat. Ezért angol nyelvű név, de a német orvostudományban bebizonyosodott.
Az ELISA teszt az orvosi laboratóriumi tesztekben alkalmazott úgynevezett immunológiai módszerek egyike. A teszt eljárás felhasználható a fehérjemolekulák detektálására a testnedvek széles választékában. Ezeknek a molekuláknak a kimutatása viszont következtetéseket vonhat le bizonyos betegségekről vagy klinikai képekről, ezért az orvosok a diagnózist az ilyen ELISA teszt eredményétől is függővé teszik. Ezért a vizsgálati eljárás nagyon fontos a mindennapi klinikai gyakorlatban, járóbeteg vagy járóbeteg.
A megfelelő testfolyadékokat, például a teljes vért vagy az ízületekből származó folyadékokat közvetlenül a laboratóriumba juttatják, miután a betegtől elvitték őket. A minták általában nagyon sürgõsek, mivel a natív anyag érzékenynek tekinthetõ, és a lehetõ leghamarabb meg kell vizsgálni. Az úgynevezett átfedéses minták hamis negatív eredményekhez vezethetnek, mivel a kimutatható patológiás fehérjék időközben csökkent vagy teljesen lebonthatók. Az úgynevezett előzetes elemzés fontos szerepet játszik az ELISA-ban; klinikai tünetek esetén a gyanús vagy negatív eredményeket meg kell ismételni.
Funkció, hatás és célok
A kémcsövek és az úgynevezett mikrotiterlemezek elengedhetetlenek az akkreditált orvosi laboratóriumban történő helyes vizsgálathoz. Ezek a finoman félig konkáv bemélyedésekkel ellátott lemezek speciális műanyagból készültek, és mindegyik nagyon specifikus antitesttel van bevonva.
Ha a kimutatandó antigén jelen van a vizsgálandó testfolyadékban, akkor egy specifikus antigén-antitest reakció lép fel az úgynevezett zár és kulcs elv szerint. A laboratóriumi dolgozók manuálisan, pipetták segítségével vagy teljesen automatikusan bevihetik a mintaanyagot a lemezekbe. A modern orvosi laboratóriumokban csak teljesen automatizált rendszereket alkalmaznak az ELISA diagnosztika elvégzésére.
Ezeket azonban képzett személyzetnek, orvosi-műszaki laboratóriumi asszisztensnek kell ellenőriznie. Az úgynevezett belső és külső minőség-ellenőrzés a laboratóriumi személyzet felelőssége, amely az orvosi személyzet alá tartozik a laboratóriumi orvoslás, a fertőzés-járványtan és a mikrobiológia területén. Az első kísérlet után, azaz miután az anyagot pipettázták a lemezekre, a mintában szereplő specifikus antigének, ha vannak, már kapcsolódtak a műanyag lemezen lévő antitestekhez.
Ezt fiziológiás sóoldattal végzett mosási ciklus követi, hogy eltávolítsák a zavaró tényezőket, például a nem kívánt antigéneket vagy fehérjéket a tételből. Ez a lépés nagyon fontos a téves pozitív reakciók elkerülése érdekében. A laboratóriumi tévesen értelmezett állítólag pozitív eredmény bizonyos körülmények között halálos következményekkel járhat a beteg számára. A vizsgálat második lépésében újabb antitestet adunk hozzá, amely egy enzimhez kapcsolódik. Ez a jelölt antitest szintén kötődik az antigénhez.
A harmadik és az utolsó lépésben egy meghatározott festéket adunk egy meghatározott mennyiségben, amelyet nagyobb vagy kisebb mértékben lebontanak a fennmaradó enzimmaradékok. Csak azt az enzimet lehet lebontani, amely korábban az antitesttel nem volt kötve az antigénhez. A szabad enzim képes hasítani a hozzáadott festéket. A megosztott festék pontos mennyiségét egy további orvosi laboratóriumi módszerrel, az úgynevezett fotometriával lehet meghatározni. Ez lehetővé teszi a pontos következtetés levonását arra vonatkozóan, hogy van-e antigén és mennyi az antigén a minta anyagában.
Az ELISA tesztet nemcsak a kezdeti diagnózishoz vagy bizonyos betegségek és klinikai képek feltételezett diagnózisának alátámasztására használják, hanem azok előrehaladásának nyomon követésére is. Ha a vizsgálat során az antigénkoncentráció alacsonyabb lesz a terápia során, akkor a terápia sikeresnek tekinthető.
Itt megtalálja gyógyszereit
Gyógyszerek a védekezés és az immunrendszer erősítéséreKockázatok, mellékhatások és veszélyek
Az ELISA-teszt különösen informatív a testfolyadékok antigénszerkezeteinek kimutatásával. A teszt lehetővé teszi az úgynevezett kvalitatív, de szemitatív és kvantitatív megállapítást is az egyes antigének feltételezhető jelenlétéről a testfolyadékokban.
A teljes vér nem használható fel a vizsgálathoz, csak vér szérum. Ennélfogva a többi szerológiai vizsgálathoz hasonlóan ez idáig nem lehetséges a páciens közvetlen vizsgálata, például az ujjhegy kapilláris véréből. A humán gyógyászatban az ELISA tesztet elsősorban antigének kimutatására használják bakteriális, vírusos vagy gombás fertőzésekben. Ezenkívül a hepatitis-szerológia összes pozitív eredményét ismét ELISA-teszttel ellenőrzik, standardként.
Bizonyos hormonokat, például a HCG terhességi hormont szintén meg lehet határozni az ELISA teszttel. Ha terhesség alatt bizonyos szövődmények lépnek fel, akkor a terhességi hormon vérkoncentrációjának pontos ismerete nagyon hasznos diagnosztikai és terápiás szempontból. A vizsgálat másik indikációs területe az úgynevezett paraproteinek kimutatása a vizeletben, mivel azok például különféle daganatos betegségekben, mint például a multiplex mieloma.
Az ELISA tesztet még ma sok laboratóriumi intézetben végzik, de a szakértők elavulttá teszik. Az ELISA tesztben az enzimhez kapcsolt immunreakciót az utóbbi években egyre inkább helyettesítik olyan radioaktív módon jelölt antitestek, amelyek még jobb mennyiségi eredményeket nyújtanak. Ezek a tesztek RIA, Radio Immunoabsorbent Assay néven is ismertek. Az ELISA további speciális fejlesztései a fénykémiai módszerek, például a lumineszcencia vagy a fluoreszcencia.
.jpg)
